在樣本研磨后,高通量組織研磨儀是怎樣提取DNA的?
2019-10-25 08:23:33
對(duì)于樣本的低溫研磨一直都是我們?cè)跇颖狙心ブ薪?jīng)常使用到的,那高通量組織研磨儀的低溫研磨又是怎樣的呢?在研磨完樣本后是如何對(duì)樣本的DNA進(jìn)行提取的呢,你知道嗎?
在使用高通量組織研磨儀設(shè)備歷經(jīng)液氮研磨的這個(gè)階段,細(xì)胞分裂務(wù)必要十分迅速,若細(xì)胞沒(méi)有完全裂化會(huì)減少其生產(chǎn)量,所以速率務(wù)必要快,不必等待液氮耗光,其余部分需立即放入-80℃的冰箱中進(jìn)行保存。在獲取的過(guò)程應(yīng)快速的進(jìn)行,否則將造成試品的脫氧核糖核酸的溶解,另外超低溫離心機(jī)也應(yīng)提前進(jìn)行預(yù)冷以作備用。
另外,上層清液不得吸入中間層的蛋白質(zhì)中,如果蛋白質(zhì)被吸入高通量組織研磨儀設(shè)備內(nèi),務(wù)必要再次使用氯仿進(jìn)行DNA的提取,因?yàn)槲氲牡鞍踪|(zhì)可能會(huì)降解核糖核酸的濃度,所以我們務(wù)必要少吸,不要貪多,以防被吸入研磨儀設(shè)備內(nèi)。
當(dāng)細(xì)胞組織從高通量組織研磨中分離出來(lái)的那一刻起,組織中的脫氧核糖核酸就一直存有被溶解的風(fēng)險(xiǎn)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,一切不經(jīng)意的粗心大意都將會(huì)導(dǎo)致核糖核酸酶遭遇環(huán)境的污染,造成試驗(yàn)的不成功。因此,我們務(wù)必要提前做好清理工作,提取速度要快。
我們可以去使用百分之75的乙醇去清洗研磨儀設(shè)備一次,以降低脫氧核糖核酸的獲取時(shí)間。然后用DEPC水溶解核糖核酸,但不要過(guò)量,以確保核糖核酸的濃度。在提取完后需要馬上開(kāi)展電泳原理檢驗(yàn),電泳檢測(cè)的時(shí)間要短速度要快, 不可以超出10分鐘哦。
在之前的樣本研磨中,我們都是在使用高通量組織研磨儀將樣本研磨成功,卻從來(lái)沒(méi)有自己進(jìn)行過(guò)樣本研磨后的DNA提取,那今天往后,我們也可以自己動(dòng)手來(lái)對(duì)研磨后的樣本進(jìn)行DNA的提取了。